هود جریان آرام

جریان آرام به عنوان جریان هوایی تعریف می شود که هوا در کل بدنه در یک فضای تعیین شده از نظر سرعت و جهت یکنواخت است.

نیمکت‌های تمیز و کابینت‌های ایمنی بیولوژیکی نمونه‌های رایج هودهای جریان آرام (معروف به هود کشت سلولی یا هود کشت بافت) هستند. آنها محفظه های آزمایشگاهی هستند که برای هدایت دقیق هوای فیلتر شده HEPA طراحی شده اند. برخی از این هودها از اقلامی که روی سطح کار قرار می گیرند از آلودگی محافظت می کنند. برخی دیگر از قرار گرفتن کاربر در معرض آلاینده ها در محل کار جلوگیری می کنند. هودهای جریان آرام اغلب برای کار با نمونه های بیولوژیکی، نیمه هادی ها یا سایر مواد حساس استفاده می شوند و معمولاً در آزمایشگاه ها به عنوان هودهای کشت سلولی یا هودهای کشت بافت شناخته می شوند.

بر اساس CDC ، اصل جریان هوای آرام برای اولین بار در اوایل دهه 1960 توسعه یافت. این هنوز هم برای آزمایشگاه‌های مدرن بسیار مرتبط است، زیرا به معنای واقعی کلمه نحوه حرکت ایمن هوا را در بسیاری از نسل‌های محفظه‌های آزمایشگاهی شکل داده است. امروزه انواع زیادی از هودهای جریان آرام وجود دارند. اگرچه آنها بسته به علم به کار برده شده در داخل محفظه متفاوت هستند، اما یک مخرج مشترک وجود دارد: همه از این نوع جریان هوای یک طرفه برای کمک به حفظ استریل بودن، جلوگیری از آلودگی متقابل و کاهش تلاطم استفاده می کنند.

جریان هوای آرام دقیقاً چیست، چرا موثر است و امروزه در آزمایشگاه ها چه کاربردی دارد؟ بیایید کاوش کنیم.

چگونه از جریان هوای آرام در انواع مختلف تجهیزات استفاده می شود؟

کابینت‌های ایمنی زیستی کلاس II ، که گاهی به عنوان هودهای کشت سلولی یا بافتی نامیده می‌شوند، محافظت از محصول را از طریق جریان پایین لایه لایه فیلتر شده با HEPA در محفظه کار حفظ می‌کنند. طبق تعریف NSF ، این کابینت های تهویه شده همچنین دارای جریان هوای داخل در جلو باز برای محافظت از اپراتورها و هوای خروجی فیلتر شده HEPA برای حفاظت از محیط زیست هستند.

• کابینت های کلاس II، نوع A، هوا را به آزمایشگاه بازمیگردانند مگر اینکه اتصال کانوپی تضمین شده باشد. کابینت های کلاس II، نوع A2 نوع رایج هود کشت بافت هستند.
• کابینت‌های کلاس II، نوع B برای استفاده با مواد شیمیایی که بخارات خطرناکی تولید می‌کنند، به بیرون مجرای سختی دارند.
• کابینت های کلاس II، نوع C1 می توانند در حالت نوع A یا نوع B کار کنند. هر مدلی که برای برنامه شما مناسب باشد، عملکرد ایمن در کابینت های ایمنی بیولوژیکی برای محافظت از یکپارچگی کار و ایمنی شخصی شما ضروری است.

نیمکت های تمیز جریان آرام برای کاربردهایی که نیاز به محافظت از محصول دارند، مانند آماده سازی پلیت محیط یا نگهداری کشت بافت مناسب هستند. نیمکت های تمیز گاهی به عنوان هودهای جریان آرام یا ایستگاه های کاری جریان هوای آرام نیز شناخته می شوند. هوا قبل از اینکه از فیلتر HEPA کشیده شود، از طریق یک پیش فیلتر واقع در بالای نیمکت تمیز به داخل کشیده می شود. این یک نوع هود کشت بافت است که می تواند با نمونه های بیولوژیکی غیر خطرناک استفاده شود.

• در یک نیمکت تمیز افقی ، هوای آرام به صورت افقی به سمت اپراتور پخش می شود. در یک نیمکت تمیز عمودی ، هوای آرام به صورت عمودی بر روی منطقه کار پخش می شود. در هر دو مورد، جریان آرام یک منطقه کاری بدون ذرات را فراهم می کند.
• هودهای PCR ، محفظه‌هایی که به طور خاص برای قرار دادن آزمایش واکنش زنجیره‌ای پلیمر طراحی شده‌اند، از جریان عمودی هوای فیلتر شده با HEPA برای حفظ محیط کاری بدون ذرات استفاده می‌کنند. یک نور UV گنجانده شده است که می تواند به دناتوره کردن مواد ژنتیکی  DNA)، RNA، و…)کمک کند و ضدعفونی ثانویه را فراهم کند.

توجه داشته باشید که برخی از دسته‌بندی‌های تجهیزات آزمایشگاهی، مانند محفظه‌های کلاس I با بافل‌های سوراخ‌دار یا برخی از هودهای بخار با کارایی بالا، از جریان آرام‌ استفاده می‌کنند.

جریان هوای منطقه ای چیست؟

جریان هوای منطقه ای طبقه بندی است که برای توصیف جریان های هوا در BSC های کلاس II استفاده می شود که واقعاً آرام یا یکنواخت نیستند. جریان هوای منطقه‌ای زمانی استفاده می‌شود که تجهیزات نتوانند به تمام حفاظت مورد نیاز کابینت ایمنی زیستی کلاس II با جریان هوای آرام استاندارد دست یابند. هر منطقه یا ستون جریان هوا تعریف شده است و محدوده خاص خود را در سرعت هوا دارد. مرزهای بین هر منطقه به دلیل جریان هوا با سرعت های مختلف، آشفتگی نشان می دهند. این دستکاری ستون های هوای مانع با سرعت بالاتر به عنوان یک راه حل مهندسی برای تجهیزاتی استفاده می شود که در غیر این صورت دارای رتبه بندی ضعیفی برای مهار یا حفاظت محصول هستند.

جریان هوای آرام با جریان رقیق سازی چه تفاوتی دارد؟

جریان رقیق سازی با جریان هوای آرام یکسان نیست. اصل جریان رقیق سازی در تجهیزاتی مانند جعبه های دستکش غیر لامینار فیلتر شده استفاده می شود. در این موارد، هوای فیلتر شده با HEPA از فیلتری ایجاد می‌شود که ناحیه کار محفظه یا جعبه دستکش را نمی‌پوشاند. این هوا با آلاینده های داخل جعبه دستکش مخلوط شده و رقیق می شود و آن آلاینده ها از طریق یک سیستم اگزوز فیلتر شده حذف می شوند. جریان هوا با الگوی رقیق‌سازی معمولاً ماهیت آشفته دارد. پس از مهر و موم شدن منبع آلودگی، نرخ رقیق سازی - یا تغییرات هوا در دقیقه - تعیین می‌کند که چقدر باید قبل از اینکه مواد از محفظه اصلی خارج شوند، سپری شود.

جریان آشفته چیست؟

در حالی که جریان آرام هوا به کاهش تلاطم کمک می کند، جریان متلاطم با ایجاد چرخش های ناخواسته هوا که ذرات را به طور تصادفی روی سطوح داخل یک محفظه قرار می دهد، آن را تشویق می کند. جریان آشفته می تواند برای کارهایی که به محیطی عاری از گرد و غبار نیاز دارد مختل شود و می تواند منجر به آلودگی شود. انسدادها، مانند اقلامی که در داخل محفظه باقی مانده اند، می توانند این آشفتگی ناخواسته را ایجاد کنند.

جهت ارتباط با واحد فروش با شماره 09924040145 تماس بگیرید.

استریل کردن با فیلتراسیون

برخی از ترکیبات محیطی مانند عصاره‌های گیاهی، هورمون‌ها و غیره حساس به حرارت هستند و به دلیل دمای بالا که در فرآیند استریل‌سازی از طریق گرما دخیل است، تمایل به تجزیه دارند. مواد حساس به حرارت به راحتی اثر خود را از دست می دهند یا در حضور گرما از بین می روند. از این رو، با استفاده از یک سرنگ/سوزن و غشای فیلتر، این مواد حساس به حرارت را می توان به سادگی با تزریق آن از طریق اتصال تیغه روی درب، در یک آماده کننده محیط اضافه کرد.

با استفاده از این روش، می توانید یک محلول مایع را از طریق یک غشاء وادار کنید تا استریل شود. اندازه منافذ در فیلتر تعیین می کند که چه اندازه میکروارگانیسم ها فیلتر شوند. با این حال، اندازه منافذ غشاء فیلتر نباید بزرگتر از 0.2 میکرون باشد. در طی این استریل کردن، تمام ذرات و میکروارگانیسم هایی که بزرگتر از قطر منافذ فیلتر هستند حذف می شوند.

هودهای لامینار کلاس 1- استریلیزاسیون هوا

به زبان ساده، میلیون ها ذره در هوای محیط شناور هستند. آنها ممکن است شامل میکروب هایی مانند ویروس ها، باکتری ها، قارچ ها و بسیاری موارد دیگر باشند. در نهایت این ذرات شناور بر روی اجسامی مانند ظروف کشت، ریزنمونه ها و غیره فرود می آیند و باعث آلودگی می شوند. به همین دلیل، لازم است اطمینان حاصل کنید که هوای تمیز و استریل روی ابزار، ظروف و نمونه های شما جریان دارد. برای دستیابی به این هدف، نیاز به تجهیزات مناسب تصفیه هوا مانند هودهای لامینار دارید. آنها دارای فیلترهای HEPA (فیلتر هوای ذرات با راندمان بالا) هستند و از این رو، هوا از این فیلتر عبور می کند و در نتیجه قارچ ها، باکتری ها و سایر ذرات گرد و غبار را به دام می اندازد. 

جهت ارتباط با واحد فروش با شماره 09924040145 تماس بگیرید.

​

 ​

آلودگی کشت بافت و 7 گام آسان برای پیشگیری

باز هم آلودگی!

کشت بافت یک فرآیند طولانی و پر زحمت است و زمانی که قارچ یا باکتری به کشت های دوست داشتنی ما حمله می کند، احساس آزاردهنده می کند.

کشت سلول ها در آزمایشگاه ها نیازمند تلاش زیادی است، از آماده سازی محیط و انتقال سلول گرفته تا نگهداری منظم. اما متأسفانه، اگر سلول‌ها آلوده شوند و کشت‌ها از بین بروند، منجر به از دست دادن زمان، تلاش و هزینه زیادی می‌شود. اگر ندانید کشت شما چگونه آلوده شده و چه نوع آلودگی دارد، مشکل بزرگتر می شود!

ویرانگر است و شما چاره ای جز تکرار آزمایشات برای نجات تحقیقات خود ندارید.

​

انواع آلودگی کشت بافت

آلودگی کشت بافت به دو گروه آلودگی شیمیایی و آلودگی بیولوژیکی طبقه بندی می شود .

آلودگی شیمیایی

آلودگی شیمیایی به دلیل وجود هر گونه اجزای غیر زنده ای رخ می دهد که بر رشد کشت شما تأثیر منفی می گذارد.

منابع و انواع آلودگی های شیمیایی عبارتند از:

محیط کشت : محیط کشت سلولی حاوی مواد مغذی، معرف ها و آب است که منابع اصلی آلودگی هستند.

سرم: تقویت کننده مواد مغذی برای کشت سلولی است. حاوی پروتئین، هورمون و برخی عوامل رشد است که رشد بافت را تحریک می کند. با این حال، تغییر در غلظت هورمون‌ها و فاکتورهای رشد می‌تواند برای کشت‌های سلولی سمی باشد.

اندوتوکسین: محصول جانبی باکتری های گرم منفی است و در آب، سرم یا سایر اجزای کشت یافت می شود. می توان آن را با روش لیمولوس آمبوسیت لیزات (LAL) تعیین کرد.

لوله‌های پلاستیکی و مخازن ذخیره‌سازی: باقیمانده‌های شیمیایی (مواد شوینده یا ضدعفونی‌کننده‌ها) در ظرف ذخیره‌سازی تمیز نشده هنگام انتقال به ظروف به داخل محیط می‌روند. علاوه بر این، نرم کننده ها نیز می توانند بر رشد کشت تأثیر بگذارند.

نور فلورسنت: می‌تواند برخی از اجزای رسانه‌ای مانند ریبوفلاوین و تریپتوفان را که پراکسید هیدروژن و رادیکال‌های آزاد سمی برای سلول‌ها آزاد می‌کنند، فعال کند.

آلودگی بیولوژیکی

آلودگی بیولوژیکی به دلیل وجود موجودات زنده در کشت ایجاد می شود. چنین ارگانیسم هایی شامل باکتری ها، مخمرها و کپک های به راحتی قابل شناسایی یا ویروس ها، تک یاخته ها و مایکوپلاسماها هستند.

باکتری ها، مخمرها و کپک ها در طبیعت در همه جا وجود دارند. بنابراین، آنها به راحتی می توانند به صورت مخفیانه وارد شوند، مستعمره شوند و در کشت های سلولی رشد کنند. از آنتی بیوتیک ها برای جلوگیری از کشت باکتری ها استفاده می شود، با این حال، برخی از سویه های مقاوم همچنان می توانند در آن رشد کنند.

باکتری‌های بسیار کوچک یا درون سلولی با رشد آهسته‌ای وجود دارند که به سختی می‌توان در طول بررسی‌های معمول کشت‌ها متوجه آنها شد. آنها می توانند به چندین کشت آسیب جدی وارد کنند.

شناسایی ویروس، تک یاخته و مایکوپلاسما که ماهیت درون سلولی دارند دشوار است. آنها نه تنها کل کشت سلولی را از بین می برند بلکه خطرات بالقوه ای برای سلامت انسان نیز به همراه دارند.

بهترین راه برای جلوگیری از آلودگی چیست؟

برای جلوگیری از آلودگی و صرفه جویی در کشت و آزمایش خود، باید اقدامات احتیاطی ارائه شده در زیر را «قبل و در حین» آزمایشات کشت بافت خود دنبال کنید:

دستکش و کت آزمایشگاه بپوشید و سازماندهی کنید: آیا تا به حال فکر کرده اید که ممکن است خودتان سلول های کشت شده را آلوده کنید؟ بله این درست است! بدن انسان مملو از باکتری است. بنابراین، بهتر است از دستکش و کت آزمایشگاهی خود استفاده کنید. باید در داخل آزمایشگاه نگهداری شود و به طور مرتب تمیز شود. همچنین می‌توانید چیزهایی را که باید به اتاق تأسیسات ببرید فهرست کنید و این به شما کمک می‌کند تا آزمایش‌های خود را در یک مرحله به پایان برسانید.

از مواد شیمیایی با عیار بالا استفاده کنید: در آزمایشات خود فقط از رسانه ها و سرم های معتبر و با درجه بالا استفاده کنید. همچنین آب و محیط کشت باید به خوبی استریل شود.

تجهیزات آزمایشگاهی را استریل کنید: تجهیزات آزمایشگاه را همیشه اتوکلاو کنید، مانند نوک پیپت، ظرف ذخیره، بشر، فورسپس و غیره. قبل از آن، مطمئن شوید که تجهیزات شما قابل اتوکلاو هستند!

امکانات را بررسی کنید: به طور منظم مرکز یا اتاقی را که سلول ها در آن کشت می شوند تمیز و استریل کنید. عملکرد جریان آرام و انکوباتورها را نیز بررسی کنید. قبل از انجام آزمایش، سطح لامینار و سایر تجهیزات را با الکل 70 درصد پاک کنید.

بررسی سلول‌های وارد شده: اگر سلول‌ها را از یک شرکت یا آزمایشگاه‌های دیگر وارد می‌کنید، بهتر است سلول را با کشت کشت حداقل به مدت دو هفته بررسی کنید. این به شما کمک می کند تا قبل از اینکه سلول ها را در مقیاس بزرگ کشت کنید، در واکنشگرها و تلاش خود صرفه جویی کنید.

از قرار گرفتن سلول در محیط های استریل نشده اجتناب کنید: همیشه سعی کنید سلول ها را در یک محیط استریل نگه دارید. انتقال سلول ها از انکوباتور به هود باید سریع باشد. اگر سلول های شما برای مدت طولانی بیرون مانده اند، آنها را در یک هود دیگر نگه دارید. این به شما کمک می کند تا کشت های دیگر خود را نیز نجات دهید.

به طور منظم سلول های کشت شده را بررسی کنید: شما کارهای زیادی برای محافظت از سلول های خود انجام داده اید و نمیخواهید در پایان کشت خود را آلوده کنید! بنابراین، مراقب کشت های خود باشید و به طور مرتب آنها را تماشا کنید.

اگرچه، به احتمال زیاد با دنبال کردن مراحل بالا می‌توانید کشت خود را نجات دهید، دقیق بودن و سازگاری با «بهترین شیوه‌ها» به همان اندازه دشوار است. با این روش ها فقط می توانید از آلودگی شیمیایی و تا حدی آلودگی بیولوژیکی نیز جلوگیری کنید. اما،با شروع مقاومت باکتری ها نسبت به آنتی بیوتیک ها، آنها دیگر بهترین راه حل برای جلوگیری از آلودگی بیولوژیکی در کشت شما باقی نمی مانند.

​